假阳性最常见的信号
阴性对照扩增、不同样本出现接近的异常 Ct、或重复实验始终在同一批试剂中出现异常阳性,通常都提示污染。
常见污染源
- 旧扩增产物气溶胶
- 模板加样区与体系配制区未分开
- 枪头、试剂或水重复暴露
- 标准品浓度过高,导致微量携带
排查思路
从“水、buffer、引物、模板、标准品、环境”逐项替换。阴性对照是定位污染最直接的工具,建议每次调整后都重新带空白对照。
本文用于科研实验排查与条件优化,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。
当阴性对照也扩增、重复出现异常阳性时,往往是体系污染、分区不清或气溶胶残留所致。
阴性对照扩增、不同样本出现接近的异常 Ct、或重复实验始终在同一批试剂中出现异常阳性,通常都提示污染。
从“水、buffer、引物、模板、标准品、环境”逐项替换。阴性对照是定位污染最直接的工具,建议每次调整后都重新带空白对照。