Western blot 转膜与封闭条件怎么优化

为什么先优化这两个环节

转膜决定目标蛋白是否顺利到膜上，封闭决定后续非特异背景是否可控。很多 Western blot 问题，最终都能追溯到这两个节点。

转膜时的几个关键点

注意膜类型、转膜时间、电流条件和蛋白分子量范围是否匹配。大分子蛋白和小分子蛋白通常需要不同的转膜策略。

封闭时的判断方法

封闭液类型、时间长短和洗膜策略都可能影响背景。优化时建议一次只调整一个变量，避免多个条件同时变化导致无法判断原因。