ELISA 的基本原理
ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种利用抗原抗体特异性结合反应来检测目标分子的免疫学技术。通过酶标记的二抗与底物反应产生颜色变化，用酶标仪读取 OD 值实现定量。
ELISA 的主要类型
双抗体夹心法
最常用的 ELISA 形式，适合检测大分子抗原。用捕获抗体包被板子，样品中的抗原与捕获抗体结合，再加入酶标记的检测抗体形成”三明治”结构。灵敏度高、特异性好。
直接法
抗原直接吸附在板子上，用酶标记的一抗检测。操作简单但灵敏度较低，且每种目标分子需要单独标记的抗体。
间接法
常用于检测抗体。先用抗原包被，再加入样品中的抗体（一抗），最后用酶标记的二抗检测。需要较长的孵育时间，但信号有放大作用。
试剂盒选择要点
板子类型
高蛋白结合力的板子适合大多数应用。注意不同品牌的板子结合力可能有差异，必要时需要做预实验验证。
抗体配对
双抗体夹心法需要两对抗体：一对抗原捕获，一对抗原检测。两对抗体必须识别同一抗原的不同表位，否则会相互竞争影响结果。
校准品与标准曲线
标准品的浓度范围应覆盖待测样品的预期值。注意标准品的基质应与样品基质一致，否则可能产生基质效应。
常见试剂盒规格
市售 ELISA 试剂盒通常提供 48 孔、96 孔或 384 孔规格。96 孔是最常用的规格，兼顾通量和样品用量。
本文用于科研实验排查与条件优化，不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。